Bakteriophagenbildschirmanzeige-Bibliotheken für Antikörper- Technik und Theorie

Bakteriophagenbildschirmanzeige-Bibliotheken für Antikörper V-Region Produktion

Bakteriophagenbildschirmanzeige-Bibliothek - Antikörper-Produktion

Diese Technik wird für das Produzieren Antikörper-wie Moleküle verwendet. Die Gensegmente, welche die Antigen-bindene Variable der V Gebiete der Antikörper verschlüsseln, werden zu den Genen fixiert, die das Mantelprotein eines Bakteriophages verschlüsseln. Der Bakteriophage, der solche Genschmelzverfahren enthält, werden benutzt, um Bakterium anzustecken, und die resultierenden Bakteriophagenpartikel haben Mäntel, die Antikörper-wie Schmelzverfahren Protein ausdrücken, wenn das Antigen-bindene Gebiet auf der Außenseite angezeigt ist, des bateriophage.

Eine Ansammlung des recombinant Bakteriums, jedes, das ein anderes Antigen-bindenes Gebiet auf seiner Oberfläche anzeigt, bekannt als Bakteriophagenbildschirmanzeigebibliothek. Auf beinahe gleiche Art und Weise, daß die Antikörper, die für ein bestimmtes Antigen spezifisch sind, von einer komplizierten Mischung durch Affinität Chromatographie lokalisiert werden können, kann das Bakterium, welches die Antigen-bindenen Gebiete spezifisch sind für ein bestimmtes Antigen ausdrückt, lokalisiert werden, indem man das Bakterium in der Bibliothek für das Binden an dieses Antigen auswählt. Die Bakteriophagenpartikel, die binden, werden, um frisches Bakterium anzustecken wieder hergestellt und benutzt. Jedes Bakteriophagen lokalisiert auf diese Art produziert einen monoclonal Antigen-bindenen Partikel, der einem monoclonal Antikörper analog ist.

Die Gene, welche die verbindliche Site des Antigens verschlüsseln, die zu Bakteriophagen jedem eindeutig sind, können von der Bakteriophagen-DNA dann erholt werden und benutzt werden, um Gene für ein komplettes Antikörpermolekül zu konstruieren, indem man dann zu den Teilen Immunoglobulingenen verbindet, die die unveränderlichen Teile des Antikörpers verschlüsseln. Wenn diese wieder aufgebauten Antikörpergene in eine verwendbare Wirtszellezeile eingeführt werden, transfected Zellen kann Antikörper mit allen wünschenswerten Eigenschaften der monoclonal Antikörper der verwendbaren Wirtszellezeile absondern.

Auf beinahe gleiche Art und Weise, daß eine Ansammlung des Bakteriums eine breite Vielzahl der möglichen Antigen-bindenen Sites anzeigen kann, kann das Bakterium auch ausgeführt werden, um eine breite Vielzahl der Antigene anzuzeigen; solch eine Bibliothek bekannt als Antigenbildschirmanzeigebibliothek. In solchen Fällen sind das Antigen, das angezeigt wird, häufig die kurzen Peptide, die durch chemisch synthetisierte DNA Reihenfolgen verschlüsselt werden, die Mischungen aller vier Nukleotide in einigen Positionen haben, damit alle möglichen Aminosäuren enthalten werden. Es ist nicht für jede Position in einem, um üblich auf diese Art, seit der Zahl variablen Positionen zu schwanken gewährt zu werden Peptid, dort ist über 2 x 1010 möglichen Reihenfolgen von acht Aminosäuren.