Χρωματογραφία συγγένειας των αντισωμάτων

Πνευματικά δικαιώματα 2006 - AntibodyStation.

Καθαρισμός του αντισώματος που χρησιμοποιεί τις μεθόδους συγγένειας

   Το συγκεκριμένο αντίσωμα μπορεί να απομονωθεί από έναν αντιορό.  Η χρωματογραφία συγγένειας χωρίζει τα μόρια στις διαφορετικές συγγένειές τους για ένα ligand.

Αυτή η μέθοδος εκμεταλλεύεται το συγκεκριμένο συσχετισμό του αντισώματος στο αντιγόνο που κρατιέται σε μια στερεά μήτρα.  Το αντιγόνο είναι συνδεδεμένο covalently στις μικρές, χημικά αντιδραστικές χάντρες, οι οποίες φορτώνονται σε μια στήλη, και ο αντιορός επιτρέπεται για να περάσει πέρα από τις χάντρες. Τα συγκεκριμένα αντισώματα δεσμεύουν, ενώ όλες οι άλλες πρωτεΐνες στον ορό, συμπεριλαμβανομένων των αντισωμάτων σε άλλες ουσίες, μπορούν να πλυθούν μακριά.

Τα συγκεκριμένα αντισώματα διαχωρίζονται με εκχύλιση έπειτα, χαρακτηριστικά με το χαμήλωμα του pH σε 2.5 ή την αύξηση του σε μεγαλύτερο από 11.  Τα αντισώματα δεσμεύουν σταθερά κάτω από τους φυσιολογικούς όρους της αλατισμένης συγκέντρωσης, τη θερμοκρασία, και το pH, αλλά ο συσχετισμός είναι αντιστρέψιμος δεδομένου ότι οι δεσμοί είναι noncovalent.

Η χρωματογραφία συγγένειας μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για να καθαρίσει τα αντιγόνα από τα σύνθετα μίγματα με τη χρησιμοποίηση των χαντρών που ντύνονται με το συγκεκριμένο αντίσωμα. 

 

Η χρωματογραφία συγγένειας χρησιμοποιεί το συσχετισμό αντιγόνο-αντισωμάτων για να καθαρίσει τα αντιγόνα ή τα αντισώματα.  Για να καθαρίσει ένα συγκεκριμένο αντιγόνο από ένα σύνθετο μίγμα μορίων, ένα μονοκλονικό αντίσωμα είναι συνδεμένο με μια αδιάλυτη μήτρα, όπως οι χάντρες χρωματογραφίας, και το μίγμα μορίων περνούν πέρα από τη μήτρα. 

Το συγκεκριμένο αντίσωμα δεσμεύει το αντιγόνο ενδιαφέροντος άλλα μόρια πλένονται μακριά. 

Το συγκεκριμένο αντιγόνο διαχωρίζεται με εκχύλιση έπειτα με την αλλαγή του pH, το οποίο μπορεί συνήθως να αναστατώσει τους δεσμούς αντίσωμα-αντιγόνων.

Τα αντισώματα μπορούν να καθαριστούν με τον ίδιο τρόπο στις χάντρες που συνδέονται με το αντιγόνο.

 

 

 

 

Πνευματικά δικαιώματα 2006 - AntibodyStation.