Cromatografía De la Afinidad - Anticuerpos

Cromatografía de la afinidad de anticuerpos

Purificación del anticuerpo usando métodos de la afinidad

El anticuerpo específico se puede aislar de un antisuero. La cromatografía de la afinidad separa las moléculas en sus afinidades que diferencian para un ligand.

Este método explota el atascamiento específico del anticuerpo al antígeno sostenido en una matriz sólida. El antígeno está limitado covalente a los granos pequeños, químicamente reactivos, que se cargan en una columna, y el antisuero se permite pasar sobre los granos. Los anticuerpos específicos atan, mientras que el resto de proteínas en el suero, incluyendo los anticuerpos a otras sustancias, se pueden lavar lejos.

Los anticuerpos específicos entonces son enjuagados, típicamente bajando el pH a 2.5 o levantándolo mayor a de 11. Los anticuerpos atan estable bajo condiciones fisiológicas de la concentración, de la temperatura, y del pH de la sal, pero el atascamiento es tan reversibles que los enlaces son noncovalent.

La cromatografía de la afinidad se puede también utilizar para purificar los antígenos de mezclas complejas usando los granos cubiertos con el anticuerpo específico.

La cromatografía de la afinidad utiliza el atascamiento del anti'geno-anticuerpo para purificar los antígenos o los anticuerpos. Para purificar un antígeno específico de una mezcla compleja de moléculas, un anticuerpo monoclonal se asocia a una matriz insoluble, tal como cromatografía rebordea, y la mezcla de moléculas se pasa sobre la matriz.

El anticuerpo específico ata el antígeno del interés; otras moléculas se lavan lejos.

El antígeno específico entonces es enjuagado alterando el pH, que puede interrumpir generalmente enlaces del anticuerpo-anti'geno.

Los anticuerpos se pueden purificar de la misma manera en los granos juntados al antígeno.

anticuerpo de la cromatografía de la afinidad