Bibliotecas phage de la visualización para la producción de la V-regio'n del anticuerpo

Biblioteca Phage De la Visualización - Producción Del Anticuerpo

Esta técnica se utiliza  para producir anticuerpo-como las moléculas.  Los segmentos del gene que codifican la variable anti'geno-que ata de los dominios de V de anticuerpos están fundidos a los genes que codifican la proteína de la capa de un bacteriófago.  El bacteriófago que contiene tales fusiones del gene se utiliza para infectar bacterias, y las partículas phage que resultan tienen capas que expresen anticuerpo-como la proteína de la fusión, con el dominio anti'geno-que ata visualizado en el exterior del bateriophage. 

Una colección del phage recombinant, cada uno que visualiza un diverso dominio anti'geno-que ata en su superficie, se conoce como biblioteca phage de la visualización.  En mucho la misma manera que los anticuerpos específicos para un antígeno determinado se pueden aislar de una mezcla compleja con cromatografía de la afinidad, phage que expresa los dominios anti'geno-que atan específicos para un antígeno determinado puede ser aislada seleccionando el phage en la biblioteca para atar a ese antígeno.  Se recuperan y se utilizan las partículas phage que atan para infectar bacterias frescas.  Cada uno phage aislada de esta manera producirá una partícula anti'geno-que ata monoclonal análoga a un anticuerpo monoclonal.

Los genes que codifican el sitio obligatorio del antígeno, que son únicos a cada uno phage, se pueden después recuperar de la DNA phage y utilizar para construir los genes para una molécula completa del anticuerpo ensamblando entonces a las partes de los genes de la inmunoglobulina que codifican las partes invariantes de un anticuerpo.  Cuando estos genes reconstruidos del anticuerpo se introducen en una línea conveniente de la célula huesped, transfected las células puede secretar los anticuerpos con todas las características deseables de anticuerpos monoclonal de la línea conveniente de la célula huesped.

En mucho la misma manera que una colección del phage puede visualizar una variedad amplia de sitios anti'geno-que atan potenciales, el phage se puede también dirigir para visualizar una variedad amplia de antígenos; tal biblioteca se conoce como biblioteca de la visualización del antígeno.  En tales casos, el antígeno visualizado es a menudo peptides cortos codificados por las secuencias químicamente sintetizadas de la DNA que tienen mezclas de los cuatro nucleotides en algunas posiciones, para incorporar todos los aminoácidos posibles.  No es generalmente para cada posición en un peptide que se permitirá para variar de esta manera, desde el número de posiciones variables, allí está sobre 2 x 1010 secuencias posibles de ocho aminoácidos.

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