Bibliotecas bacteriófagas de la visualización para la producción de la V-región del anticuerpo

Biblioteca bacteriófaga de la visualización - producción del anticuerpo

Esta técnica se utiliza para producir anticuerpo-como las moléculas.  El gene divide la codificación en segmentos de la variable antígeno-obligatoria de los dominios de V de anticuerpos está fundido a los genes que codifican la proteína de la capa de un bacteriófago.  El bacteriófago que contiene tales fusiones del gene se utiliza para infectar bacterias, y las partículas bacteriófagas resultantes tienen capas que expresen anticuerpo-como la proteína de la fusión, con el dominio antígeno-obligatorio visualizado en el exterior del bateriophage. 

Una colección de fago recombinante, cada uno que visualiza un diverso dominio antígeno-obligatorio en su superficie, se conoce como biblioteca bacteriófaga de la visualización.  Más o menos de la misma manera que los anticuerpos específicos para un antígeno determinado se pueden aislar de una mezcla compleja con cromatografía de afinidad, el fago que expresa los dominios antígeno-obligatorios específicos para un antígeno determinado puede ser aislado seleccionando el fago en la biblioteca para atar a ese antígeno.  Las partículas bacteriófagas que atan se recuperan y se utilizan para infectar bacterias frescas.  Cada uno bacteriófago aislado de esta manera producirá una partícula antígeno-obligatoria monoclonal análoga a un anticuerpo monoclonal.

Los genes que codifican el punto de enlace del antígeno, que son únicos a cada fago, se pueden después recuperar de la DNA bacteriófaga y utilizar para construir los genes para una molécula completa del anticuerpo ensamblando entonces a las partes de los genes de la inmunoglobulina que codifican las partes invariantes de un anticuerpo.  Cuando estos genes reconstruidos del anticuerpo se introducen en una variedad de células conveniente del ordenador principal, las células transfected pueden secretar los anticuerpos con todas las características deseables de anticuerpos monoclonales de la variedad de células conveniente del ordenador principal.

Más o menos de la misma manera que una colección de fago puede visualizar una gran variedad de sitios antígeno-obligatorios potenciales, el fago se puede también dirigir para visualizar una gran variedad de antígenos; tal biblioteca se conoce como biblioteca de la visualización del antígeno.  En tales casos, el antígeno visualizado es a menudo péptidos cortos codificados por las secuencias químicamente sintetizadas de la DNA que tienen mezclas de los cuatro nucleótidos en algunas posiciones, para incorporar todos los aminoácidos posibles.  No es generalmente para cada posición en un péptido que se permitirá variar de esta manera, desde el número de posiciones variables, allí está sobre 2 x 1010 secuencias posibles de ocho aminoácidos.

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