Chromatographie d'Affinité - Anticorps

Chromatographie d'affinité des anticorps

Purification d'anticorps en utilisant des méthodes d'affinité

L'anticorps spécifique peut être isolé dans un antisérum. La chromatographie d'affinité sépare des molécules sur leurs affinités différentes pour un ligand.

Cette méthode exploite la liaison spécifique de l'anticorps à l'antigène tenu sur une matrice pleine. L'antigène est lié en covalence aux petits, chimiquement réactifs petits programmes, qui sont chargés en colonne, et on permet à l'l'antisérum de passer au-dessus des petits programmes. Les anticorps spécifiques lient, alors que toutes les autres protéines dans le sérum, y compris les anticorps à d'autres substances, peuvent être enlevées.

Les anticorps spécifiques sont alors élués, typiquement en abaissant le pH à 2.5 ou en le soulevant à 11 plus grands que. Les anticorps lient stablement dans des conditions physiologiques de concentration, de température, et de pH en sel, mais l'attache est tout réversibles que les obligations sont noncovalent.

La chromatographie d'affinité peut également être employée pour purifier des antigènes des mélanges complexes en utilisant des petits programmes enduits de l'anticorps spécifique.

La chromatographie d'affinité emploie l'attache d'antigène-anticorps pour purifier des antigènes ou des anticorps. Pour purifier un antigène spécifique d'un mélange complexe des molécules, un anticorps monoclonal est attaché à une matrice insoluble, telle que la chromatographie perle, et le mélange des molécules est passé au-dessus de la matrice.

L'anticorps spécifique lie l'antigène d'intérêt ; d'autres molécules sont enlevées.

L'antigène spécifique est alors élué en modifiant le pH, qui peut habituellement perturber des obligations d'anticorps-antigène.

Des anticorps peuvent être purifiés de la même manière sur des petits programmes couplés à l'antigène.

anticorps de chromatographie d'affinité