Microarrays d'anticorps

Microarrays d'anticorps une introduction

Pour un article plus détaillé dans le développement et les protocoles de microarray d'anticorps, voir le notre article de Microarray d'anticorps à la station moléculaire.

La génomique et la technologie de microarray d'ADN nous ont permises d'analyser presque tous les mRNAs en même temps et de déterminer si l'expression d'ADN messagère est changée dans des états de la maladie. Cependant, la concentration d'une ADN messagère spécifique dans une cellule habituellement est mal corrélée avec l'abondance réelle de la protéine. les demi vies d'ADN messagère dans une cellule peuvent être des heures long (même des jours), tandis que les niveaux de protéine peuvent changer tout à fait rapidement.

Les microarrays d'ADN laissent beaucoup à désirer. Ils mesurent simplement une ÉTAPE dans le processus menant aux produits finis, protéine fonctionnelle d'a entièrement - (même les protéines peuvent avoir besoin des modifications et de la phosphorylation poteau-de translation à la fonction d'une certaine voie !).

En mesurant la quantité de la protéine spécifique directement, nous pouvons mesurer l'expression vraie de la fonction de gène.

Quand on prend en compte le grand nombre de modifications poteau-de translation,

Les cellules humaines peuvent contenir des variantes million ou plus différentes de protéine dues à un grand nombre de modifications poteau-de translation possibles (par exemple phosphorylation sur un ensemble différent de résidus). Dans une maladie indiquée, un ensemble de ces modifications en une protéine peut être essentiel dans la progression de la maladie.

Avec l'état actuel des microarrays d'anticorps ou des puces d'anticorps, la science peut maintenant avoir des solutions à ce problème. Une glissière ou une « puce » de microarray d'anticorps pourrait être repérée avec des milliers d'anticorps connus semblables à la voie qu'un microarray d'ADN est fait, et lier aux anticorps sur la puce pourrait être mesure quand un échantillon biologique est ajouté. Les puces de protéine deviennent rapidement une méthode rapide et de haut-débit de profiler des changements de protéine de la maladie et de divers états et stimulus de cellules.

Pourquoi dépensez 500$ sur un anticorps quand vous pouvez avoir un alignement entier d'anticorps de 500-2000 anticorps pour environ $2000 ?

La plupart des puces de microarray d'anticorps d'ab peuvent être analysées utilisant le matériel de lecture fluorescent de microarray standard d'ADN qui est facilement disponible dans la plupart des hôpitaux et instituts de recherche de recherche. Le processus est simple et la quantité de données qui sont produites est tout à fait grande.

Processus d'utiliser un Microarray d'anticorps :

Extrayez les protéines cellulaires totales à partir des échantillons biologiques d'intérêt
Étiquetez les protéines extraites avec les colorants fluorescents (par exemple Cy-3 et Cy-5)
Retirez le colorant non lié (le lavage)
Incubez les protéines étiquetées avec le microarray d'anticorps
Balayez l'alignement
Analysez les résultats de microarray d'anticorps

Idées de penser à :

- Les compagnies prépareront maintenant les puces faites sur commande de Microarray d'anticorps et de protéine utilisant l'immunisation de peptide ou les anticorps monoclonaux.

- L'analyse différentielle d'expression de protéine peut être conduite utilisant des microarrays d'anticorps permettant le profilage de protéine.

Fournisseurs des Microarrays d'anticorps :

Clontech

Eurogentec - microarrays faits sur commande d'anticorps et microarrays de protéine.

Arrayit - Microarrays d'anticorps

Sigma-Aldrich - kit de Microarray d'anticorps. Microarray pour signaler l'analyse : Kit de signalisation de cellules de Microarray de Panorama™ ab

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