Anticorps Microarrays

Anticorps Microarrays une introduction

Pour un article plus détaillé dans le développement et les protocoles microarray d'anticorps, voir le notre article de Microarray d'anticorps à la station moléculaire.

La génomique et la technologie microarray d'ADN nous ont permises d'analyser presque tous les mRNAs en même temps et de déterminer si l'expression de mRNA est changée dans des états de la maladie. Cependant, la concentration d'un mRNA spécifique dans une cellule habituellement est mal corrélée avec l'abondance réelle de la protéine. les demi vies de mRNA dans une cellule peuvent être des heures long (même des jours), tandis que les niveaux de protéine peuvent changer tout à fait rapidement.

Les microarrays d'ADN partent de beaucoup à désirer. Ils mesurent simplement une ÉTAPE dans le processus menant au produit final, une protéine entièrement fonctionnelle (même les protéines peuvent avoir besoin des modifications et de la phosphorylation poteau-de translation à la fonction dans une certaine voie !).

En mesurant la quantité de la protéine spécifique directement, nous pouvons mesurer l'expression vraie de la fonction de gène.

Quand on prend en compte le grand nombre de modifications poteau-de translation,

Les cellules humaines peuvent contenir des variantes million ou plus différentes de protéine dues à un grand nombre de modifications poteau-de translation possibles (par exemple phosphorylation sur un ensemble différent de résidus). Dans une maladie indiquée, un ensemble de ces modifications en une protéine peut être essentiel dans la progression de la maladie.

Avec l'état actuel des microarrays d'anticorps ou des puces d'anticorps, la science peut maintenant avoir des solutions à ce problème. Une glissière ou une "puce" microarray d'anticorps pourrait être repèrée avec des milliers d'anticorps connus semblables à la voie que une ADN microarray est faite, et lier aux anticorps sur la puce pourrait être mesure quand un échantillon biologique est ajouté. Les puces de protéine deviennent rapidement une méthode rapide et de haut-débit de profiler des changements de protéine de la maladie et de divers états et stimulus de cellules.

Pourquoi dépensez 500$ sur un anticorps quand vous pouvez avoir un alignement entier d'anticorps de 500-2000 anticorps pour environ $2000 ?

La plupart des puces microarray d'anticorps de ab peuvent être analysées utilisant le matériel de lecture fluorescent microarray standard d'ADN qui est aisément disponible dans la plupart des hôpitaux et instituts de recherche de recherche. Le processus est simple et la quantité de données qui sont produites est tout à fait grande.

Processus d'utiliser un anticorps Microarray :

Extrayez les protéines cellulaires totales à partir des échantillons biologiques d'intérêt
Étiquetez les protéines extraites avec les colorants fluorescents (par exemple Cy-3 et Cy-5)
Retirez le colorant non lié (lavage)
Incubez les protéines étiquetées avec de l'anticorps microarray
Balayez l'alignement
Analysez les résultats microarray d'anticorps

Idées de penser à :

- les compagnies prépareront maintenant les puces faites sur commande de Microarray d'anticorps et de protéine en utilisant l'immunisation de peptide ou les anticorps monoclonaux.

- l'analyse différentielle d'expression de protéine peut être conduite en utilisant des microarrays d'anticorps permettant le profilage de protéine.

Fournisseurs d'anticorps Microarrays :

Clontech

Eurogentec - microarrays faits sur commande d'anticorps et microarrays de protéine.

Arrayit - Anticorps Microarrays

Sigma-Aldrich - kit de Microarray d'anticorps. Microarray pour signaler l'analyse : Cellule™ Du Panorama Ab Microarray Signalant Le Kit

Pour un article plus détaillé dans le développement et les protocoles microarray d'anticorps, voir le notre article de Microarray d'anticorps à la station moléculaire.