Anticorpi monoclonali per analisi occidentale della macchia:
Un anticorpo monoclonale fornisce l'più alte specificità, purezza e consistenza che gli anticorpi policlonali, con conseguente ambiti di provenienza più bassi nei risultati occidentali della macchia.
Sguardo per creare gli anticorpi specifici per la vostra proteina di interesse? Ci sono molti servizi su ordinazione che possono creare un anticorpo monoclonale per voi in parecchie settimane ai mesi.
Ci sono parecchi modi di preparazione degli anticorpi monoclonali:
Per i peptidi come antigeni:
- mg 10 è abbastanza generalmente
- meno peptide può essere necessario se il vostro peptide altamente è purificato
- se avete bisogno della purificazione di affinità di un anticorpo, mg intorno 15 di peptide può essere necessario nel modulo asciutto.
Per gli antigeni della proteina:
- 2-5 mg di antigene della proteina ad una concentrazione di 0.5-1 mg/ml sono solitamente necessari.
- indichi il buffer usato e la concentrazione nella proteina.
- La proteina dovrebbe essere mg 3 - 5 ad una concentrazione di 0.5 mg/ml o di più.
- per purificazione di affinità dell'anticorpo, mg 5 di proteina solubile è necessario preparare una colonna di immunoaffinity.
Gli anticorpi monoclonali sono eccellenti come l'anticorpo primario in un'analisi dovuto la loro grande specificità. Monoclonals riconosce soltanto un epitopo dell'antigene ed è altamente specifico a quell'antigene particolare e così solitamente darà sostanzialmente meno contesto che macchia che gli anticorpi policlonali. Una volta confrontata all'eterogeneità degli anticorpi policlonali, l'omogeneità degli anticorpi monoclonali è molto alta. Se le circostanze sperimentali sono costante mantenuta, usando gli anticorpi monoclonali renderà i risultati consitently riproducibili fra le repliche sperimentali dovuto la natura clonale degli anticorpi monoclonali. La loro specificità egualmente li rende estremamente efficienti per il legame dell'antigene all'interno di una miscela delle molecole relative, quale nel caso di purificazione di affinità.
Gli anticorpi monoclonali (mAb) sono un singolo tipo di anticorpo che sono identici e sono diretti contro un epitopo specifico (antigene, determinante antigenico) e sono prodotti dai cloni della B-cella di una famiglia monoparentale o di singola varietà di cellula dell'ibridoma. Una varietà di cellula dell'ibridoma è costituita dalla fusione di un linfocita dell'una B-cella con una cella di mieloma. Alcune celle di mieloma sintetizzano naturalmente i singoli anticorpi di mAb.
Produzione dell'anticorpo monoclonale
Fornitori dell'anticorpo monoclonale
Produzione dei fagi dell'anticorpo della visualizzazione
Anticorpi monoclonali su ordinazione
Aziende di produzione dell'anticorpo