Librerie dei fagi della visualizzazione per produzione di V-regione dell'anticorpo

Libreria dei fagi della visualizzazione - produzione dell'anticorpo

Questa tecnica è usata per la produzione anticorpo-come le molecole.  Il gene suddivide la codifica della variabile in codice antigene-legante dei settori di V degli anticorpi è fuso ai geni che mettono la proteina in codice del cappotto di un batteriofago.  Il batteriofago che contiene tali fusioni del gene è usato per infettare i batteri e le particelle dei fagi risultanti hanno cappotti che esprimono anticorpo-come la proteina di fusione, con il settore antigene-legante video sulla parte esterna del bateriophage. 

Una collezione di fago recombinant, ciascuno che video un settore antigene-legante differente sulla relativa superficie, è conosciuta come libreria dei fagi della visualizzazione.  Più o meno allo stesso modo che gli anticorpi specifici per un antigene particolare possono essere isolati da una miscela complessa dalla cromatografia di affinità, il fago che esprime i settori antigene-leganti specifici per un antigene particolare può essere isolato selezionando il fago nella libreria per legare a quell'antigene.  Le particelle dei fagi che legano sono recuperate ed usate per infettare i batteri freschi.  Ciascuno dei fagi isolato in questo modo produrrà una particella antigene-legante monoclonale analoga ad un anticorpo monoclonale.

I geni che mettono il luogo in codice obbligatorio dell'antigene, che sono unici ad ogni fago, possono allora essere recuperati dal DNA dei fagi ed essere usati per costruire i geni per una molecola completa dell'anticorpo unendosi allora alle parti dei geni dell'immunoglobulina che mettono le parti in codice invariabili di un anticorpo.  Quando questi geni ricostruiti dell'anticorpo sono introdotti in una varietà di cellula adatta ospite, le celle transfected possono secernere gli anticorpi con tutte le caratteristiche desiderabili degli anticorpi monoclonali della varietà di cellula adatta ospite.

Più o meno allo stesso modo che una collezione di fago può video un'ampia varietà di luoghi antigene-leganti potenziali, il fago può anche essere costruito per video un'ampia varietà di antigeni; una tal libreria è conosciuta come libreria della visualizzazione dell'antigene.  In tali casi, l'antigene video è spesso brevi peptidi messi dalle sequenze chimicamente sintetizzate del DNA che hanno miscele di tutti e quattro i nucleotidi in alcune posizioni, di modo che tutti gli amminoacidi possibili sono incorporati.  Non è usuale per ogni posizione in un peptide da concedersi variare in questo modo, dal numero delle posizioni variabili, là è oltre 2 x 1010 sequenze possibili di otto amminoacidi.

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