ELISAのRadioimmunoassays

版権2006年- AntibodyStation。

Radioimmunoassay (RIA)、および酵素リンクされたimmunosorbentの試金(ELISA)、および競争の阻止試金。

Radioimmunoassay (RIA)および酵素リンクされたimmunosorbentの試金(ELISA)は同じ主義で抗体のための直接結合の試金か抗原および両方動作するであるが、特定の結合を検出する方法は異なっている。  RadioimmunoassaysはELISAの試金はウイルスの診断で頻繁に使用されるが広く使われている血および組織液のホルモンのレベルを測定するために。  これらの方法1つは知られていた抗原の純粋な準備がか抗体両方のために、試金を標準化することをまたは両方、必要とする。  この試金は純粋な抗体のサンプルと記述されるが、純粋な抗原が代りに使用されれば主義は類似している。  抗原のためのRIAでは、その抗原に対する純粋な抗体は125Iと放射能によって、通常分類される; ELISAのために、酵素は抗体に化学的にリンクされる。  この場合抗原である無標号のコンポーネントはある程度蛋白質を吸収するプラスチックmultiwellの版の井戸のような一致した指示に、接続する。  

分類された抗体が無指定の吸収が妨げられる、どの自由な抗体でもおよび他の蛋白質は洗い流される条件の下で無標号の抗原に、結合する。

RIAに結合する抗体は着色された反作用の製品に無色の基板を変換する反作用によって上塗を施してある井戸によって、一方結合するElisaで保たれる放射能の量の点では直接検出される測定される。  反作用の皿のカラー変更は直接読むことができ、データ収集を非常に容易にさせる、ELISAはまた放射能の危険を避ける。  これはELISAに多くのための好まれる方法を直接結合の試金作る。

RIAかELISAでまた分類された反免疫グロブリンの抗体が無標号の抗原上塗を施してある版に無標号の抗体の結合を検出するのに使用することができる。  この場合、分類された反免疫グロブリンの抗体は`第2 layer'.と名づけられるものがで使用される。  第2層の使用はまた分類された反immunoglobinの抗体の少なくとも2分子が各々の無標号の抗体に結合できるので、シグナルを増幅する。  RIAおよびELISAはまた追加される版および分類された抗原でスタックする無標号の抗体と遂行することができる。

図:  酵素の原則はリンクしたimmunosorbentの試金(ELISA)を

抗原Aを検出するためには、抗原Aのための浄化された抗体の細目は酵素に化学的にリンクされる。  テストされるべきサンプルは無指定に結合するプラスチック井戸の表面に上塗を施してある。 プラスチックの残りの粘着性があるサイトは関係がない蛋白質の妨げられる(示されていない)追加によって。  分類された抗体が条件の下の井戸にそれから非特定の結合追加される  

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