Immunofluorescenceの顕微鏡検査

Immunofluorescenceの顕微鏡検査について学びなさい

抗体は固定して結合し、とりわけ対応する抗原に、セルの特定の分子を、ティッシュ、またはティッシュ、または生物的液体識別するためのプローブとして非常に貴重である。  いろいろ異なった分類の技術によって抗体の分子が単一セルまたはティッシュセクションでターゲット分子を正確に見つけるのに使用することができる。  抗体自体、かそれを検出するのに使用されるantiimmunoglobulinの抗体が蛍光染料と分類されるとき技術はimmunoflurescenceの顕微鏡検査として知られている。  すべての血清学の技術でように、抗体は抗原に固定して結合し、完全な洗浄によって除去されるように自由な抗体がする。  蛋白質への抗体がネイティブの表面機能を認識するように、折られた蛋白質抗体の反作用が行われた後やっと固定であるフリーズされたティッシュセクションの使用によって、どちらか維持される通常追求された必要性がある蛋白質のネイティブ構造。  しかしある抗体は変化しても、そのような抗体は固定ティッシュセクションの蛋白質にとりわけ結合する蛋白質を結合し。

蛍光染料は特定の抗体に共有に直接接続することができるが一般には、バインドされた抗体は蛍光反免疫グロブリン、間接immunofluorescenceとして知られている技術によって検出される。  immunofluroscenceのために選択される染料は1つの波長のライトによって、通常青か緑出、可視スペクトルの別の波長のライトを出す。  赤灯を出す、およびローダミンおよびフィコエリトリン(PE)であるライト、テキサスの赤およびPeridinnのクロロフィル蛋白質(PerCP)をemitsgreenオレンジか赤灯を出す共通の蛍光染料はフルオレスセイン。  選択的なフィルターの使用によって、染料から来る使用されるライトかflurochromeだけけい光顕微鏡で検出される。  この技術があらゆる蛋白質の分布を検出するのに使用することができる。  異なった抗体に異なった染料を接続することによって、2つ以上の分子の分布は同じセルかティッシュセクションで定めることができる。

セルまたはティッシュの極めて薄い光学セクションを作り出すのにコンピュータ利用技術を使用する共焦点の蛍光顕微鏡の最近の進展は精巧なサンプル準備のための必要性なしで非常に高リゾリューションのimmunofluorescenceの顕微鏡検査を与える。  共焦点の顕微鏡の解像度は低強度の照明を使用してflurochromeを刺激するために2つの光子が必要となるように更に高めることができる。  脈打ったレーザ光線はmicroscopeisの焦点面に蛍光性を刺激すること十分な強度集中するときだけ、使用され。  このように蛍光性の放出自体は光学セクションに制限することができる。

顕微鏡検査の領域の1つの重要な開発はセルが接触に互いに入って来るとき敏感なデジタルビデオ・カメラがセル膜および再分配の蛍光に分類された分子の動きを記録する時間経過のずっとビデオ顕微鏡検査の使用である。  セル表面の分子は2つの主要な方法で蛍光に分類することができる。  1つは興味の蛋白質のために特定の抗体のflurochrome分類されたすてきなフラグメントの結合によって行う; 他は興味の蛋白質がGFPのようなくらげから得られる蛍光蛋白質の系列の1つに接続した融合蛋白質の生成によって行う。  使用できる蛍光ラベルのリストは今赤く、青、青緑色またはyellw蛍光蛋白質を含んでいる。

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