De Chromatografie van de affiniteit van Antilichamen

Auteursrecht 2006 - AntibodyStation.

Reiniging van Antilichaam dat de Methodes van de Affiniteit gebruikt

   Het specifieke antilichaam kan van een antiserum worden geïsoleerdk.  De Chromatografie van de affiniteit scheidt molecules op hun verschillende affiniteiten voor een ligand.

Deze methode exploiteert de specifieke band van antilichaam aan antigeen dat op een stevige matrijs wordt gehouden.  Het antigeen is covalent verbindend aan kleine, chemisch reactieve parels, die in een kolom worden geladen, en het antiserum wordt toegestaan om over de parels over te gaan. De specifieke antilichamen binden, terwijl alle andere proteïnen in het serum, met inbegrip van de antilichamen aan andere substanties, kunnen worden gereinigd.

De specifieke antilichamen worden dan uitgewassen, typisch door pH aan 2.5 te verminderen of het op te heffen aan groter dan 11.  De antilichamen binden stabiel onder fysiologische voorwaarden van zoute concentratie, temperatuur, en pH, maar de band is omkeerbaar aangezien de banden noncovalent zijn.

De chromatografie van de affiniteit kan ook worden gebruikt om antigenen van complexe mengsels te zuiveren door parels te gebruiken die met specifiek antilichaam met een laag worden bedekt. 

 

De chromatografie van de affiniteit gebruikt antigeen-antilichaam band om antigenen of antilichamen te zuiveren.  Om een specifiek antigeen van een complex mengsel van molecules te zuiveren, is een monoclonal antilichaam in bijlage aan een onoplosbare matrijs, zoals chromatografieparels, en het mengsel van molecules wordt overgegaan over de matrijs. 

Het specifieke antilichaam bindt het antigeen van belang; andere molecules worden gereinigd. 

Het specifieke antigeen wordt dan uitgewassen door pH te veranderen, die antilichaam-antigeen banden kan gewoonlijk onderbreken.

De antilichamen kunnen op de zelfde manier op parels worden gezuiverd die aan antigeen worden gekoppeld.

 

 

 

 

Auteursrecht 2006 - AntibodyStation.