Phage Bibliotheken van de Vertoning voor het v-Gebied van het Antilichaam Productie

Phage Bibliotheek van de Vertoning - de Productie van het Antilichaam

Deze techniek wordt gebruikt voor het produceren van antilichaam-als molecules.  De segmenten die van het gen de antigeen-band variabele van de domeinen van V van antilichamen coderen worden aan genen gesmolten die de laagproteïne van een bacteriofaag coderen.  De bacteriofaag die dergelijke genfusies bevat wordt gebruikt om bacteriën te besmetten, en de resulterende phage deeltjes hebben lagen die de antilichaam-als fusieproteïne uitdrukken, met het antigeen-bindend domein dat op buiten bateriophage wordt getoond. 

Een inzameling van recombinante bacteriofaag, elk die een verschillend antigeen-bindend domein op zijn oppervlakte toont, is gekend als phage vertoningsbibliotheek.  Op gelijkaardige wijze dat de antilichamen specifiek voor een bepaald antigeen van een complex mengsel door affiniteitchromatografie kunnen worden geïsoleerde, kan de bacteriofaag die antigeen-bindende domeinen specifiek voor een bepaald antigeen uitdrukt worden geïsoleerdb door de bacteriofaag in de bibliotheek te selecteren voor het binden aan dat antigeen.  De phage deeltjes worden die binden teruggekregen en gebruikt om verse bacteriën te besmetten.  Elke op deze wijze geïsoleerdee bacteriofaag zal een monoclonal antigeen-bindend deeltje analoog aan een monoclonal antilichaam produceren.

De genen die de plaats van de antigeenband coderen, die aan elke bacteriofaag uniek zijn, kunnen dan van phage DNA worden teruggekregen en worden gebruikt om genen voor een volledige antilichamenmolecule door dan toe te treden aan delen van immunoglobulin genen te construeren die de onveranderlijke delen van antilichaam coderen.  Wanneer deze opnieuw opgebouwde antilichamengenen in een geschikte gastheercellenvariëteit worden geïntroduceerdg, transfected cellen kan antilichamen met alle wenselijke kenmerken van monoclonal antilichamen van de geschikte gastheercellenvariëteit afscheiden.

Op gelijkaardige wijze dat een inzameling van bacteriofaag een grote verscheidenheid van potentiële antigeen-bindende plaatsen kan tonen, kan de bacteriofaag ook worden gebouwd om een grote verscheidenheid van antigenen te tonen; zulk een bibliotheek is gekend als bibliotheek van de antigeenvertoning.  In zulke gevallen, is het getoonde antigeen vaak korte peptides die door de chemisch samengestelde opeenvolgingen van DNA wordt gecodeerd die mengsels van alle vier nucleotiden in sommige posities hebben, zodat alle mogelijke aminozuren worden opgenomen.  Het is niet gebruikelijk voor elke positie in peptide om worden toegestaan om, sinds het aantal veranderlijke posities op deze wijze te variëren, zijn er meer dan 2 x 1010 mogelijke opeenvolgingen van acht aminozuren.

Auteursrecht 2006 - AntibodyStation.