Phage Display Libraries for Antibody V-region Production Phage Display Biblioteki na V-Antibody regionu Produkcja

Phage Display Library - Antibody Production Phage Display Biblioteka - Antibody Production

This technique is used  for producing antibody-like molecules.  Gene segments encoding the antigen-binding variable of V domains of antibodies are fused to genes encoding the coat protein of a bacteriophage.  Bacteriophage containing such gene fusions are used to infect bacteria, and the resulting phage particles have coats that express the antibody-like fusion protein, with the antigen-binding domain displayed on the outside of the bateriophage. Technika ta jest wykorzystywana do produkcji przeciwciał, jak cząsteczki. Gene segmentów kodowania zmiennej wiążące antygen-V domen przeciwciał są scalane do genów kodujących białka w płaszcz z bakteriofag. Bakteriofag zawierające gen fusions takie są wykorzystywane do zainfekowania bakterie, a wynikające fagu cząsteczki mają płaszcze, że wyrażenia takie jak synteza przeciwciało-białko, z antygenów wiążących domeny wyświetlane na zewnątrz z bateriophage.

A collection of recombinant phage, each displaying a different antigen-binding domain on its surface, is known as a phage display library.  In much the same way that antibodies specific for a particular antigen can be isolated from a complex mixture by affinity chromatography, phage expressing antigen-binding domains specific for a particular antigen can be isolated by selecting the phage in the library for binding to that antigen.  The phage particles that bind are recovered and used to infect fresh bacteria.  Each phage isolated in this way will produce a monoclonal antigen-binding particle analogous to a monoclonal antibody. Kolekcja rekombinacji fagu, każdy wyświetlania różnych antygenów wiążących domeny na jej powierzchni, jest znany jako fagu wyświetlania biblioteki. W bardzo podobny sposób, że przeciwciała specyficzne dla danego antygenu może być oddzielony od mieszaniny złożonych przez chromatografii powinowactwa, fagu wyrażania antygenów wiążących domen specyficzne dla danego antygenu mogą być odizolowane przez wybranie fagu w bibliotece wiążące dla tego antygenu. fagu cząstek, które wiążą są odzyskiwane i wykorzystywane do zakażenia świeżego bakterie. Każdy fagu odizolowane w taki sposób będzie wytwarzać przeciwciała monoklonalnego antygenów wiążących cząstek analogiczne do przeciwciałem monoklonalnym.

The genes encoding the antigen binding site, which are unique to each phage, can then be recovered from the phage DNA and used to construct genes for a complete antibody molecule by joining then to parts of immunoglobulin genes that encode the invariant parts of the an antibody.  When these reconstructed antibody genes are introduced into a suitable host cell line, the transfected cells can secrete antibodies with all the desirable characteristics of monoclonal antibodies of the suitable host cell line. W genów kodujących antygen wiąże strony, które są specyficzne dla każdego fagu, może następnie zostać odzyskane od fagu DNA i użyte do budowy genów dla kompletnego przez cząsteczki przeciwciała łącząca następnie do części immunoglobuliny genów, które kodują w invariant części z przeciwciało . Po tych genów przeciwciał zrekonstruowane zostały wprowadzone do odpowiedniej komórki gospodarza linii, transfected komórek może secrete przeciwciał wszystkie pożądane właściwości przeciwciała monoklonalne do odpowiednich linii komórek gospodarza.

In much the same way that a collection of phage can display a wide variety of potential antigen-binding sites, the phage can also be engineered to display a wide variety of antigens; such a library is known as an antigen display library.  In such cases, the antigen displayed are often short peptides encoded by chemically synthesized DNA sequences that have mixtures of all four nucleotides in some positions, so that all possible amino acids are incorporated.  It is not usual for every position in a peptide to be allowed to vary in this way, since the number of variable positions, there are over 2 x 1010 possible sequences of eight amino acids. W bardzo podobny sposób, że zbiór fagu może wyświetlać szeroki wachlarz potencjalnych miejsc wiążących antygen, fagu można również inżynierii, aby wyświetlić szereg antygenów; takiej biblioteki jest znany jako antygen wyświetlania biblioteki. W takich przypadkach , Antygen wyświetlane są często krótkie peptydy zakodowane przez chemicznej syntezy DNA, sekwencje, które mieszaniny wszystkich czterech nukleotydów w kilka miejsc, więc możliwe, że wszystkie aminokwasy są włączone. To nie jest zwykle dla każdego stanowiska w peptydów, które mają być dopuszczone do różnią się w w ten sposób, ponieważ liczba miejsc zmienna jest ponad 2 x 1010 z ośmiu możliwych sekwencji aminokwasów.

Copyright 2006 - AntibodyStation. Copyright 2006 - AntibodyStation.