Cromatografia de afinidade dos anticorpos

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Purificação do anticorpo usando métodos da afinidade

   O anticorpo específico pode ser isolado de um anti-soro.  A cromatografia de afinidade separa moléculas em suas afinidaoes de deferimento para um ligand.

Este método explora o emperramento específico do anticorpo ao antígeno prendido em uma matriz contínua.  O antígeno é limitado covalently aos grânulos pequenos, quimicamente reactivos, que são carregados em uma coluna, e o anti-soro é permitido passar sobre os grânulos. Os anticorpos específicos ligam, quando todas as proteínas restantes no soro, incluindo os anticorpos a outras substâncias, puderem ser lavadas afastado.

Os anticorpos específicos eluted então, tipicamente abaixando o pH a 2.5 ou levantando o a maior de 11. anticorpos ligam estàvel sob circunstâncias physiological da concentração, da temperatura, e do pH de sal, mas o emperramento é por mais reversíveis que as ligações sejam noncovalent.

A cromatografia de afinidade pode igualmente ser usada para purify antígenos das misturas complexas usando os grânulos revestidos com o anticorpo específico. 

 

A cromatografia de afinidade usa o emperramento do antígeno-anticorpo para purify antígenos ou anticorpos.  Para purify um antígeno específico de uma mistura complexa das moléculas, um anticorpo monoclonal é anexado a uma matriz insolúvel, tal como a cromatografia perla, e a mistura das moléculas é passada sobre a matriz. 

O anticorpo específico liga o antígeno do interesse; outras moléculas são lavadas afastado. 

O antígeno específico eluted então alterando o pH, que pode geralmente interromper ligações do anticorpo-antígeno.

Os anticorpos podem purified na mesma maneira nos grânulos acoplados ao antígeno.

 

 

 

 

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