Chromatography Da Afinidade - Antibodies

Chromatography da afinidade dos antibodies

Purification do antibody usando métodos da afinidade

O antibody específico pode ser isolado de um antiserum. O chromatography da afinidade separa moléculas em suas afinidaoes diferindo para um ligand.

Este método explora o emperramento específico do antibody ao antígeno prendido em uma matriz contínua. O antígeno é limitado covalently aos grânulos pequenos, quimicamente reactive, que são carregados em uma coluna, e o antiserum é permitido passar sobre os grânulos. Os antibodies específicos ligam, quando todas as proteínas restantes no serum, including os antibodies a outras substâncias, puderem ser lavadas afastado.

Os antibodies específicos eluted então, tipicamente abaixando o pH a 2.5 ou levantando o mais extremamente a de 11. Os antibodies ligam estàvel sob circunstâncias physiological da concentração, da temperatura, e do pH de sal, mas o emperramento é por mais reversíveis que as ligações sejam noncovalent.

O chromatography da afinidade pode também ser usado purify antígenos das misturas complexas usando os grânulos revestidos com o antibody específico.

O chromatography da afinidade usa o emperramento do antígeno-antigen-antibody purify antígenos ou antibodies. Para purify um antígeno específico de uma mistura complexa das moléculas, um antibody monoclonal é unido a uma matriz insoluble, tal como o chromatography beads, e a mistura das moléculas é passada sobre a matriz.

O antibody específico liga o antígeno do interesse; outras moléculas são lavadas afastado.

O antígeno específico eluted então alterando o pH, que pode geralmente disrupt ligações do antibody-antígeno.

Os antibodies podem purified na mesma maneira nos grânulos acoplados ao antígeno.

antibody do chromatography da afinidade