Phage Display Libraries for Antibody V-region Production Phage Afișarea Biblioteci pentru Antibody V-regiune de producție

Phage Display Library - Antibody Production Phage Afișarea Biblioteca - Antibody Productie

This technique is used  for producing antibody-like molecules.  Gene segments encoding the antigen-binding variable of V domains of antibodies are fused to genes encoding the coat protein of a bacteriophage.  Bacteriophage containing such gene fusions are used to infect bacteria, and the resulting phage particles have coats that express the antibody-like fusion protein, with the antigen-binding domain displayed on the outside of the bateriophage. Această tehnică este utilizată pentru producerea de anticorpi, cum ar fi-moleculelor. Gene segmente de codare de antigen-binding variabilă de V domenii de anticorpi sunt topite pentru a genelor de codare a unei proteine paltoane bacteriophage. Bacteriophage conțin astfel de gene fusions sunt folosite pentru a infecta bacterii, și care rezultă Phage particule au paltoane, care exprima anticorp-ca proteină de fuziune, cu caracter obligatoriu, domeniul de antigen afisate pe partea exterioară a bateriophage.

A collection of recombinant phage, each displaying a different antigen-binding domain on its surface, is known as a phage display library.  In much the same way that antibodies specific for a particular antigen can be isolated from a complex mixture by affinity chromatography, phage expressing antigen-binding domains specific for a particular antigen can be isolated by selecting the phage in the library for binding to that antigen.  The phage particles that bind are recovered and used to infect fresh bacteria.  Each phage isolated in this way will produce a monoclonal antigen-binding particle analogous to a monoclonal antibody. O colectie de recombinare a Phage, fiecare afișând un alt domeniu de antigen-obligatorii de pe suprafata acestuia, este cunoscut ca un Phage afișa biblioteca. În același fel de mult ca anticorpi specifice pentru un anumit antigen care pot fi izolate dintr-un amestec complex de cromatografia de afinitate, Phage exprimă antigen-binding domenii specifice pentru un anumit antigen care pot fi izolate prin selectarea Phage în bibliotecă pentru că obligatorii pentru a antigenului. Phage particule care sunt obligati de recuperat și utilizat pentru a infecta proaspete de bacterii. Fiecare Phage izolate, în acest fel, va produce un monoclonal antigen-binding particule similare la un anticorp monoclonal.

The genes encoding the antigen binding site, which are unique to each phage, can then be recovered from the phage DNA and used to construct genes for a complete antibody molecule by joining then to parts of immunoglobulin genes that encode the invariant parts of the an antibody.  When these reconstructed antibody genes are introduced into a suitable host cell line, the transfected cells can secrete antibodies with all the desirable characteristics of monoclonal antibodies of the suitable host cell line. Gene de codare a site-ului de antigen obligatorii, care sunt unice pentru fiecare Phage, pot fi apoi recuperate de la Phage de ADN și de folosit pentru a construi gene pentru o moleculă de anticorpi pentru a se alătura apoi părți din immunoglobulin gene care codifică de Invariant părți ale un anticorp . Atunci când aceste reconstrucții, anticorpi gene sunt introduse într-o linie de celule gazdă adecvate, transfected celule pot secrete anticorpi cu toate caracteristicile de dorit de anticorpi monoclonali din linie de celule gazdă adecvate.

In much the same way that a collection of phage can display a wide variety of potential antigen-binding sites, the phage can also be engineered to display a wide variety of antigens; such a library is known as an antigen display library.  In such cases, the antigen displayed are often short peptides encoded by chemically synthesized DNA sequences that have mixtures of all four nucleotides in some positions, so that all possible amino acids are incorporated.  It is not usual for every position in a peptide to be allowed to vary in this way, since the number of variable positions, there are over 2 x 1010 possible sequences of eight amino acids. În același fel de mult ca o colecție de Phage poate afișa o gamă largă de potențiali antigen-binding site-uri, Phage poate fi, de asemenea, proiectat pentru a afișa o mare varietate de antigene; o astfel de bibliotecă este cunoscut ca un antigen de afișare biblioteca. În astfel de cazuri , Antigenul afisate sunt adesea de scurtă peptide sintetizate chimic codificate prin secvente de ADN care au amestecuri de toate cele patru nucleotides în anumite poziții, astfel încât toate posibilele amino-acizi sunt încorporate. Nu este uzuală pentru fiecare poziție într-o peptida trebuie să li se permită să varieze în Astfel, având în vedere că numărul de variabilă de poziții, există mai mult de 2 x 1010 posibile secvențe de opt aminoacizi.

Copyright 2006 - AntibodyStation. Copyright 2006 - AntibodyStation.