Микроскопия Иммунофлуоресценции

Выучьте О Микроскопии Иммунофлуоресценции

Антитела связывают стабилизированно и специфически к их соответствуя антигену, они неоцененны как зонды для определять определенную молекулу в клетках, тканях, или тканях, или биологических жидкостях.  Молекулы антитела могут быть использованы для того чтобы обнаружить местонахождение их молекулы цели точно в одиночных клетках или в разделах ткани разнообразием по-разному обозначая методов.  Когда антитело само, или антитело antiimmunoglobulin используемое для того чтобы обнаружить его обозначены с дневной краской метод как микроскопия immunoflurescence.  Как в всех серологических методах, антитело связывает стабилизированно к своему антигену, позволяющ unbound антитело извлечься тщательным запитком.  По мере того как антитела к протеинам узнают поверхностные характеристики уроженца, сложенный протеин родная структура протеина изыскиваемыми обычно потребностями быть сохраненным, то путем использование, котор замерли разделов ткани которые фикчированы only after реакция антитела была выполнена.  Некоторые антитела, однако, связывают протеины even if они денатурированы, и такие антитела свяжут специфически ровную к протеину в фикчированных разделах ткани.

Дневную краску можно ковалентно прикрепиться сразу к специфически антителу, но more commonly, связанное антитело обнаружено дневным анти-immunoglobulinom, методом известным как косвенно иммунофлуоресценция.  Краски выбранные для immunofluroscence ы светом одной длины волны, обычно голубо или зелено, и испускают свет по-разному длины волны в видимом спектре.  Самые общие дневные краски будут флуоресцеином, которые emitsgreen протеин хлорофилла света, красного цвета texas и Peridinn (PerCP), которые испускают красный свет, и родамином и фикоэритрином (PE) которые испускают свет orange/red.  Путем использование селективных фильтров, только свет приходя от краски или используемое flurochrome обнаружены в микроскопе флуоресцирования.  Этот метод можно использовать для того чтобы обнаружить распределение любого протеина.  Путем прикреплять по-разному краски к по-разному антителам, распределение два или несколько молекула можно обусловить в таких же клетке или разделе ткани.

Новейшаяа разработка confocal дневного микроскопа, который использует computer-aided методы для того чтобы произвести ультратонкий оптически раздел клетки или ткани, дает очень high resolution микроскопию иммунофлуоресценции без потребности для разработанной подготовки образца.  Разрешение confocal микроскопа можно более в дальнейшем увеличить использующ освещение низк-intensivnosti так, что необходимы, что возбудили 2 фотона flurochrome.  Использован пульсированный лазерныйа луч, и только когда он сфокусирован в фокальная плоскость microscopeis интенсивность достаточно для того чтобы возбудить флуоресцирование.  В этой дороге излучение самого флуоресцирования можно ограничить к оптически разделу.

Одним важным развитием в зоне микроскопии была польза микроскопии врем-time-lapse видео-, в которой чувствительные цифровые видео- камеры записывают движение fluorescently обозначенных молекул в мембранах клетки и их перераспределении когда клетки come into контакт с собой.  молекулы Клетк-poverxnosti можно fluorescently обозначить в 2 главным образом дорогах.  Одно вязкой флурочюроме-oboznacennyx частей Fab антител специфически для протеина intrest; другое путем производить протеин сплавливания, в котором  протеин intrest был прикреплен до одна из семьи florescent протеинов полученных от медуз как GFP.  Перечень имеющиеся дневные ярлыки теперь вклюает протеины красных, голубых, cyan или yellw дневные.

Авторское право 2006 - AntibodyStation.