Микроскопия иммунофлуоресценции

Выучьте о микроскопии иммунофлуоресценции

Антитела связывают стабилизированно и специфически к их соответствуя антигену, они неоцененны как зонды для определять определенную молекулу в клетках, тканях, или тканях, или биологических жидкостях.  Молекулы антитела могут быть использованы для того чтобы обнаружить местонахождение их молекулы цели точно в одиночных клетках или в разделах ткани разнообразие различными обозначая методами.  Когда антитело само, или антитело antiimmunoglobulin используемое для того чтобы обнаружить его обозначены с люминесцентной краской метод как микроскопия immunoflurescence.  Как в всех серологических методах, антитело связывает стабилизированно к своему антигену, позволяющ unbound антителу извлечься тщательным запитком.  По мере того как антитела к протеинам узнают поверхностные характеристики уроженца, сложенный протеин родная структура протеина изыскиваемыми обычно потребностями быть сохраненным, то путем использование, котор замерли разделов ткани которые фикчированы only after реакция антитела была выполнена.  Некоторые антитела, однако, связывают протеины даже если они денатурированы, и такие антитела свяжут специфически даже к протеину в фикчированных разделах ткани.

Люминесцентную краску можно ковалентно прикрепиться сразу к специфическому антителу, но более обыкновенно, связанное антитело обнаружено дневным anti-иммуноглобулином, методом известным как косвенная иммунофлуоресценция.  Краски выбранные для immunofluroscence выйдены светом одной длины волны, обычно голубо или зелено, и испускают свет различной длины волны в видимом спектре.  Самые общие люминесцентные краски флуоресцеин, которые emitsgreen протеин хлорофилла света, красного цвета Техас и Peridinn (PerCP), которые испускают красный свет, и родамин и фикоэритрин (PE) которые испускают помеец/красный свет.  Путем использование селективных фильтров, только свет приходя от краски или используемое flurochrome обнаружены в люминесцентном микроскопе.  Этот метод можно использовать для того чтобы обнаружить распределение любого протеина.  Путем прикреплять различные краски к различным антителам, распределение двух или больше молекул можно определить в таких же клетке или разделе ткани.

Новейшая разработка confocal флюоресцентного микроскопа, который использует computer-aided методы для того чтобы произвести ультратонкий оптически раздел клетки или ткани, дает очень высокую микроскопию иммунофлуоресценции разрешения без потребности для разработанной подготовки образца.  Разрешение confocal микроскопа можно более в дальнейшем увеличить используя освещение низк-интенсивности так, что необходимы, что возбудили 2 фотона flurochrome.  Использован пульсированный лазерный луч, и только когда он сфокусирован в фокальную плоскость microscopeis интенсивность достаточная для того чтобы возбудить флуоресцирование.  В этом путе излучение самого флуоресцирования можно ограничить к оптически разделу.

Одно важное развитие в зоне микроскопии польза врем-lapse видео- микроскопия, в которой чувствительные цифровые видеокамеры записывают движение дневно обозначенных молекул в мембранах клетки и их перераспределении когда клетки приходят в контакт друг с другом.  молекулы Клетк-поверхности можно дневно обозначить в 2 главным образом путях.  Одно вязкой flurochrome-обозначенных сказочных частей антител специфических для протеина интереса; другое путем производить протеин сплавливания, в котором протеин интереса был прикреплен до одна из семьи дневных протеинов полученных от медуз как GFP.  Список имеющихся дневных ярлыков теперь включает протеины красных, голубых, cyan или yellw дневные.

Авторское право 2006 - AntibodyStation.