ELISA 放射免疫测定

版权2006 年- AntibodyStation 。

放射免疫测定(RIA), 和酵素被链接的免疫吸附剂检验(ELISA), 和竞争禁止检验。

放射免疫测定(RIA) 并且酵素被链接的免疫吸附剂检验(ELISA) 是直接约束检验为抗体或抗原和两个从事同样原则, 但检测特定捆绑手段是不同的。  放射免疫测定是常用评定激素的级别在血液和组织流体里, 当ELISA 检验频繁地被使用在病毒诊断。  为这两个方法你需要知道的抗原的一种纯净的准备或抗体, 或两个, 为了规范化检验。  这个检验将被描述与纯净的抗体范例, 但原则相似如果纯净的抗原改为被使用。  在RIA 为抗原, 纯净的抗体反对那抗原放射性地被标记, 通常与125.I; 为ELISA, 酵素与抗体化工被链接。  未贴标签的要素, 在这种情况下会是抗原, 附有坚实技术支持, 譬如塑料multiwell 板材的井, 将吸收某一相当数量任一蛋白质。  

被标记的抗体被允许束缚对未贴标签的抗原, 在未指明的吸收被阻拦的情况下, 并且任一未捆绑的抗体和其它蛋白质冲走。

抗体束缚对RIA 被评定直接地根据相当数量放射线由上漆的井保留, 但是在Elisa, 束缚由转换一个无色的基体成一个色的回应产品的回应检测。  颜色变化可能读直接地在回应盘子上, 使数据收集非常容易, 并且ELISA 并且避免放射线危险等级。  这做ELISA 更喜欢的方法为更多直接约束检验。

被标记的反免疫球蛋白抗体可能并且被使用在RIA 或ELISA 检测未贴标签的抗体捆绑对未贴标签的抗原上漆的板材。  在这种情况下, 被标记的反免疫球蛋白抗体被使用在什么被命名 ‘第二块层’。  对第二块层的用途并且放大信号, 因为至少被标记的anti-immunoglobin 抗体的二个分子能束缚对各未贴标签的抗体。  RIA 和ELISA 可能并且被执行与未贴标签的抗体被困住在板材和被标记的抗原被添加。

图:  酵素的原则链接了免疫吸附剂检验(ELISA)

检测抗原A, 被净化的抗体特定为抗原A 与酵素化工被链接。  范例被测试是上漆的他们nonspecifically 束缚塑料井的表面。残余的稠粘的站点在塑料由添加阻拦毫不相关的蛋白质(没被显示) 。  被标记的抗体然后被添加来井在非特定捆绑的情况下  

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