螢光免疫檢驗法顯微學技術和理論

螢光免疫檢驗法顯微學

得知螢光免疫檢驗法顯微學

抗體穩定束縛得並且特定對他們對應的抗原, 他們是無價的作為探針為辨認一個特殊分子在電池裡、組織、或組織, 或生物流體。抗體分子可能靠各種各樣不同的標記的技術使用準確地找出他們的目標分子單細胞或組織部分。當抗體, 或antiimmunoglobulin 抗體被使用檢測它被標記與一種螢光染料技術為人所知當immunoflurescence 顯微學。和在所有血清學技術, 抗體穩定束縛對其抗原, 允許未捆綁的抗體被詳盡的洗滌物去除。如同抗體對蛋白質認可當地人的表面功能, 被摺�&的蛋白質蛋白質的當地結構是通常被尋找的需要由使用保存, 或者是固定的凍結的組織部分在抗體回應執行了之後。一些抗體, 然而, 束縛蛋白質既使他們被弈質, 並且這樣抗體將束縛特定對蛋白質在固定的組織部分。

螢光染料可能共價地附有直接地特定抗體, 但通常, 一定的抗體由螢光反免疫球蛋白, 技術檢測以間接螢光免疫檢驗法著名。染料被選擇為immunofluroscence 由一個波長光退出, 通常藍色或綠色, 和散發一個另外波長的光在可視光譜。散發orange/red 光的最公用的螢光染料是熒光素, emitsgreen 光、得克薩斯紅色和Peridinn 綠葉素蛋白質(PerCP), 散發紅燈, 並且玫瑰紅顏料和藻紅素(PE) 。由使用有選擇性的補白, 唯一光來自染料或flurochrome 被使用被檢測在熒光顯微鏡。這個技術可能使用檢測任一蛋白質的配電器。由附有不同的染料不同的抗體, 二個或更多分子的配電器可能被確定在同樣電池或組織部分。

confocal 螢光顯微鏡的新發展, 使用電腦輔助的技術導致電池或組織的一個超薄的光學部分, 給非常高分辨率螢光免疫檢驗法顯微學沒有對精心製作的範例準備的需要。 confocal 顯微鏡的解決方法可能進一步被增加使用低強度照明以便二個光子必需激發flurochrome 。搏動的雷射束被使用, 和只當它被聚焦入microscopeis 的焦點飛機強度充足激發熒光。這樣熒光放射可能被限於光學部分。

一重要發展在顯微學面積是對時間流逝錄影顯微學的用途, 敏感數字式攝像機記錄fluorescently 被標記的分子運動在細胞膜和他們的再分配當電池進入互相聯絡。電池表面分子可能fluorescently 被標記用二種主要方式。你是由抗體的flurochrome 被標記的很好的片段捆綁特定為蛋白質intrest; 其他是由生成融合蛋白質, 在裡蛋白質intrest 附有了到一個繁榮昌盛的蛋白質系列被獲得從水母像GFP 。可利用的螢光標籤列表現在包括紅色, 藍色, 藍綠色或yellw 螢光蛋白質。

版權2006 年- AntibodyStation 。